<!DOCTYPE HTML PUBLIC "-//W3C//DTD HTML 4.0 Transitional//EN">
<HTML><HEAD>
<META http-equiv=Content-Type content="text/html; charset=iso-8859-1">
<META content="MSHTML 6.00.2900.2180" name=GENERATOR>
<STYLE></STYLE>
</HEAD>
<BODY bgColor=#ffffff>
<DIV><FONT face=Arial size=2>
<P class=MsoNormal style="MARGIN: 0cm -4.05pt 0pt 0cm; TEXT-ALIGN: center"
align=center><A name=OLE_LINK2><STRONG><SPAN lang=ES-AR
style="COLOR: black; FONT-FAMILY: Arial; mso-ansi-language: ES-AR"><FONT
size=3>Seminarios del Dpto. de Química Inorgánica, Analítica y Química Física /
INQUIMAE</FONT></SPAN></STRONG></A><SPAN style="mso-bookmark: OLE_LINK2"><SPAN
style="FONT-SIZE: 10pt; FONT-FAMILY: Arial"><?xml:namespace prefix = o ns =
"urn:schemas-microsoft-com:office:office" /><o:p></o:p></SPAN></SPAN></P>
<P class=MsoNormal
style="MARGIN: 0cm -4.05pt 0pt 0cm; TEXT-ALIGN: center; mso-outline-level: 2"
align=center><FONT size=3><SPAN style="mso-bookmark: OLE_LINK2"><STRONG><SPAN
lang=ES-AR
style="COLOR: black; FONT-FAMILY: Arial; mso-ansi-language: ES-AR">FCEyN -
Universidad de Buenos Aires</SPAN></STRONG></SPAN><SPAN
style="mso-bookmark: OLE_LINK2"><SPAN
style="FONT-FAMILY: Arial"><o:p></o:p></SPAN></SPAN></FONT></P>
<P class=MsoNormal
style="MARGIN: 0cm -4.05pt 0pt 0cm; TEXT-ALIGN: center; mso-outline-level: 2"
align=center><SPAN style="mso-bookmark: OLE_LINK2"><SPAN
style="FONT-FAMILY: Arial"><FONT
size=3> <o:p></o:p></FONT></SPAN></SPAN></P>
<P class=MsoNormal
style="MARGIN: 0cm -4.05pt 0pt 0cm; TEXT-ALIGN: center; mso-outline-level: 2"
align=center><FONT size=3><SPAN style="mso-bookmark: OLE_LINK2"><STRONG><SPAN
lang=PT-BR
style="COLOR: black; FONT-FAMILY: Arial; mso-ansi-language: PT-BR">2do.
Cuatrimestre, 2006</SPAN></STRONG></SPAN><SPAN
style="mso-bookmark: OLE_LINK2"><SPAN lang=PT-BR
style="FONT-FAMILY: Arial; mso-ansi-language: PT-BR"><o:p></o:p></SPAN></SPAN></FONT></P>
<P class=MsoNormal
style="MARGIN: 0cm -4.05pt 0pt 0cm; TEXT-ALIGN: center; mso-outline-level: 2"
align=center><SPAN style="mso-bookmark: OLE_LINK2"><SPAN lang=PT-BR
style="FONT-FAMILY: Arial; mso-ansi-language: PT-BR"><o:p><FONT
size=3> </FONT></o:p></SPAN></SPAN></P>
<P class=MsoNormal
style="MARGIN: 0cm -4.05pt 0pt 0cm; TEXT-ALIGN: center; mso-outline-level: 2"
align=center><SPAN style="mso-bookmark: OLE_LINK2"><SPAN lang=PT-BR
style="FONT-FAMILY: Arial; mso-ansi-language: PT-BR"><o:p><FONT
size=3> </FONT></o:p></SPAN></SPAN></P>
<P class=MsoNormal
style="MARGIN: 0cm -4.05pt 0pt 0cm; TEXT-ALIGN: center; mso-outline-level: 2"
align=center><SPAN style="mso-bookmark: OLE_LINK2"><SPAN lang=PT-BR
style="FONT-FAMILY: Arial; mso-ansi-language: PT-BR"><FONT
size=3> <o:p></o:p></FONT></SPAN></SPAN></P>
<P class=MsoNormal
style="MARGIN: 0cm -4.05pt 0pt 0cm; TEXT-ALIGN: center; mso-outline-level: 2"
align=center><SPAN style="mso-bookmark: OLE_LINK2"><STRONG><SPAN
style="FONT-SIZE: 14pt; COLOR: black; FONT-FAMILY: Arial">Viernes 15 de
Diciembre, 13.00h</SPAN></STRONG></SPAN><SPAN
style="mso-bookmark: OLE_LINK2"><B><SPAN
style="COLOR: black; FONT-FAMILY: Arial"><BR><STRONG><SPAN
style="FONT-FAMILY: Arial"><FONT size=3>Aula Seminarios, DQIAyQF-
INQUIMAE<o:p></o:p></FONT></SPAN></STRONG></SPAN></B></SPAN></P>
<P class=MsoNormal
style="MARGIN: 0cm 2.2pt 0pt 0cm; LINE-HEIGHT: 12pt; TEXT-ALIGN: center; mso-pagination: none"
align=center><FONT size=3><SPAN style="mso-bookmark: OLE_LINK2"><STRONG><SPAN
lang=ES-AR
style="COLOR: black; FONT-FAMILY: Arial; mso-ansi-language: ES-AR">Ciudad
Universitaria, Pab. II, Piso 3</SPAN></STRONG></SPAN><SPAN
style="mso-bookmark: OLE_LINK2"><B><U><SPAN
style="mso-bidi-font-size: 10.0pt"><o:p></o:p></SPAN></U></B></SPAN></FONT></P>
<P class=MsoNormal style="MARGIN: 0cm 0cm 0pt; TEXT-ALIGN: justify"><SPAN
style="mso-bookmark: OLE_LINK2"><SPAN lang=EN-GB
style="FONT-SIZE: 11pt; mso-ansi-language: EN-GB"><o:p><FONT
face="Times New Roman"> </FONT></o:p></SPAN></SPAN></P>
<P class=MsoNormal style="MARGIN: 0cm 0cm 0pt; TEXT-ALIGN: justify"><SPAN
style="mso-bookmark: OLE_LINK2"><SPAN lang=EN-GB
style="FONT-SIZE: 11pt; mso-ansi-language: EN-GB"><o:p><FONT
face="Times New Roman"> </FONT></o:p></SPAN></SPAN></P>
<P class=MsoNormal style="MARGIN: 0cm 0cm 0pt; TEXT-ALIGN: justify"><SPAN
style="mso-bookmark: OLE_LINK2"><SPAN lang=EN-GB
style="FONT-SIZE: 11pt; FONT-FAMILY: Arial; mso-ansi-language: EN-GB"><o:p> </o:p></SPAN></SPAN></P>
<P class=MsoNormal style="MARGIN: 0cm 0cm 0pt; TEXT-ALIGN: justify"><SPAN
style="mso-bookmark: OLE_LINK2"><SPAN lang=EN-GB
style="FONT-SIZE: 11pt; FONT-FAMILY: Arial; mso-ansi-language: EN-GB"><o:p> </o:p></SPAN></SPAN></P>
<P class=MsoNormal style="MARGIN: 0cm 0cm 0pt; TEXT-ALIGN: center"
align=center><SPAN style="mso-bookmark: OLE_LINK2"><SPAN lang=EN-GB
style="FONT-SIZE: 14pt; FONT-FAMILY: Arial; mso-ansi-language: EN-GB">Dr.
Mariano L. Bossi<o:p></o:p></SPAN></SPAN></P>
<P class=MsoNormal style="MARGIN: 0cm 0cm 0pt; TEXT-ALIGN: center"
align=center><SPAN style="mso-bookmark: OLE_LINK2"><SPAN lang=EN-GB
style="FONT-SIZE: 14pt; FONT-FAMILY: Arial; mso-ansi-language: EN-GB">Dept. of
NanoBiophotonics<o:p></o:p></SPAN></SPAN></P>
<P class=MsoNormal style="MARGIN: 0cm 0cm 0pt; TEXT-ALIGN: center"
align=center><SPAN style="mso-bookmark: OLE_LINK2"><SPAN lang=EN-GB
style="FONT-SIZE: 14pt; FONT-FAMILY: Arial; mso-ansi-language: EN-GB">Max Planck
Institute for Biophysical Chemistry (MPI-BPC)<o:p></o:p></SPAN></SPAN></P>
<P class=MsoNormal style="MARGIN: 0cm 0cm 0pt"><SPAN
style="mso-bookmark: OLE_LINK2"><o:p><FONT face="Times New Roman"
size=3> </FONT></o:p></SPAN></P>
<P class=MsoNormal style="MARGIN: 0cm 0cm 12pt; TEXT-ALIGN: center"
align=center><SPAN style="mso-bookmark: OLE_LINK2"><SPAN lang=ES-AR
style="FONT-SIZE: 14pt; FONT-FAMILY: Arial; mso-ansi-language: ES-AR">Microscopías
avanzadas de fluorescencia con resolución por debajo de la barrera de la
difracción.<o:p></o:p></SPAN></SPAN></P>
<P class=MsoNormal style="MARGIN: 0cm 0cm 12pt; TEXT-ALIGN: center"
align=center><SPAN style="mso-bookmark: OLE_LINK2"><SPAN lang=ES-AR
style="FONT-SIZE: 14pt; FONT-FAMILY: Arial; mso-ansi-language: ES-AR"><o:p> </o:p></SPAN></SPAN></P>
<P class=MsoNormal
style="MARGIN: 0cm 0cm 0pt; TEXT-INDENT: 18pt; TEXT-ALIGN: justify"><SPAN
style="mso-bookmark: OLE_LINK2"><SPAN lang=ES-AR
style="FONT-FAMILY: Arial; mso-ansi-language: ES-AR"><FONT size=3>Durante más de
un siglo, la resolución de microscopios de campo lejano (<I
style="mso-bidi-font-style: normal">wide field</I>) estuvo limitada por la
difracción. Basados en el uso de lentes convencionales para enfocar la luz,
dicha resolución está estrictamente relacionada con el tamaño del punto focal,
obteniéndose con luz visible una resolución de aproximadamente 200 nm en el
plano focal (resolución lateral) y 600 nm en el eje óptico (resolución axial),
con detección confocal. Un nuevo concepto, introducido por el grupo del Prof.
Stefan Hell, permite vencer el límite impuesto por la difracción sin necesidad
de abandonar el concepto de luz enfocada, y dio lugar a una familia de técnicas
de microscopía de fluorescencia agrupadas bajo el nombre </FONT><A
name=OLE_LINK4></A><A name=OLE_LINK3><SPAN style="mso-bookmark: OLE_LINK4"><I
style="mso-bidi-font-style: normal"><FONT
size=3>RESOLFT</FONT></I></SPAN></A><FONT size=3> (<I
style="mso-bidi-font-style: normal"><U>re</U>versible <U>s</U>aturable
<U>o</U>ptical <U>f</U>luorescence <U>t</U>ransitions</I>). Estas técnicas se
basan en efectuar una transición saturable entre dos estados moleculares, uno de
los cuales es responsable de la emisión de fluorescencia, con un haz de luz que
posea una distribución espacial de intensidad incluyendo al menos un punto de
cero intensidad. La resolución obtenible está determinada por la intensidad de
luz aplicada, y la intensidad necesaria para saturar la transición. Distintos
tipos de transiciones moleculares dan lugar a distintas técnicas dentro de la
familia <I
style="mso-bidi-font-style: normal">RESOLFT</I>.<o:p></o:p></FONT></SPAN></SPAN></P>
<P class=MsoNormal
style="MARGIN: 0cm 0cm 0pt; TEXT-INDENT: 18pt; TEXT-ALIGN: justify"><SPAN
style="mso-bookmark: OLE_LINK2"><SPAN lang=ES-AR
style="FONT-FAMILY: Arial; mso-ansi-language: ES-AR"><o:p><FONT
size=3> </FONT></o:p></SPAN></SPAN></P>
<P class=MsoNormal
style="MARGIN: 0cm 0cm 0pt; TEXT-INDENT: 18pt; TEXT-ALIGN: justify"><SPAN
style="mso-bookmark: OLE_LINK2"><SPAN lang=ES-AR
style="FONT-FAMILY: Arial; mso-ansi-language: ES-AR"><FONT size=3>En este
seminario se explicará en detalle el concepto de funcionamiento de las
microscopías de tipo <I style="mso-bidi-font-style: normal">RESOLFT</I> y el
estado actual de las mismas (principalmente <I
style="mso-bidi-font-style: normal">STED</I>, <I
style="mso-bidi-font-style: normal"><U>st</U>imulated <U>e</U>mission
<U>d</U>epletion</I>), y en particular la correspondiente técnica de la familia
basada en la aplicación de sondas fotocrómicas fluorescentes. El uso de
compuestos “biestables” o de largo tiempo de vida, mayores a los nanosegundos
observados para el primer estado singulete excitado (usado en <I
style="mso-bidi-font-style: normal">STED</I>), disminuye el valor de la
intensidad de saturación de la transición de interés. Por ende, el uso de estos
compuestos reduce en varios órdenes de magnitud la intensidad de luz necesaria
para la obtención de una resolución por debajo del límite de difracción, con la
consiguiente ventaja que esto representa, particularmente con respecto a su
aplicación a la observación de células y organismos vivos. Utilizando un sistema
formado por un compuesto fotocrómico de la familia de las fulgidas y una
cumarina fluorescente dispersos en un polímero, hemos demostrado prácticamente a
modo de prueba de principios, una resolución lateral de aproximadamente 50 nm.
La intensidad de luz aplicada es del orden de 100 W/cm<SUP>2</SUP> con láseres
continuos (<I style="mso-bidi-font-style: normal">cw</I>), en un microscopio de
fluorescencia de epi-iluminación con detección confocal. La escasez de
compuestos fotocrómicos fluorescentes y la necesidad de obtener un número
elevado de ciclos de irradiación de los mismos representa por un lado una
limitación, y por otro abre un desafío en cuanto al diseño de nuevas sondas
aplicables a esta técnica de microscopía, que será también brevemente
discutido.<o:p></o:p></FONT></SPAN></SPAN></P>
<P class=MsoNormal style="MARGIN: 0cm 0cm 0pt; TEXT-ALIGN: justify"><SPAN
style="mso-bookmark: OLE_LINK2"><SPAN lang=ES-AR
style="FONT-SIZE: 11pt; mso-ansi-language: ES-AR"><o:p><FONT
face="Times New Roman"> </FONT></o:p></SPAN></SPAN></P>
<P class=MsoNormal style="MARGIN: 0cm -4.05pt 0pt 0cm; TEXT-ALIGN: center"
align=center><SPAN style="mso-bookmark: OLE_LINK2"><BR></SPAN><SPAN
style="mso-bookmark: OLE_LINK2"><SPAN
style="FONT-FAMILY: 'ITC Zapf Dingbats'; mso-bidi-font-family: Arial"><FONT
size=3>iiiii</FONT></SPAN></SPAN><SPAN
style="FONT-FAMILY: 'ITC Zapf Dingbats'; mso-bidi-font-family: Arial"><o:p></o:p></SPAN></P></FONT></DIV></BODY></HTML>